2024/11/22
在細胞培養的小宇宙中,每個細胞都有自己的“小情緒”,生長狀態不佳、活力不足,或許只是因為沒有找到最合適的血清。別擔心,今天我們就來聊聊如何安撫細胞的“小情緒”,揭秘血清選擇的秘訣,讓您在細胞培養的路上無憂前行!
細胞“挑食”,血清是關鍵
血清,作為細胞培養基的重要組成部分,富含生長因子、激素、貼壁因子等關鍵營養素,是細胞健康生長與增殖的基石。但你知道嗎?不同來源、不同品質的血清,對細胞的影響可是天差地別!就像人一樣,吃對了食物,才能精神飽滿、活力四射;細胞也是如此,選對了血清,才能茁壯成長、繁殖迅速。
如何選擇合適的血清
根據實驗需求選擇血清類型
細胞類型:不同類型的細胞對血清的要求不同。例如,干細胞、淋巴細胞、神經細胞等通常需要使用胎牛血清,而腫瘤細胞則可能使用小牛血清即可。
圖1 HyClone胎牛血清培養干細胞
實驗目的:根據實驗目的,選擇適合的血清。如果實驗需要高濃度的生長因子,那么可能需要選擇含有豐富生長因子的血清。
考慮血清的質量因素
產地與來源:選擇來自合法且正規途徑的血清。我國對于動物源制品的進口有嚴格的規定,目前批準進口的胎牛血清來源主要是澳大利亞、新西蘭和烏拉圭。因此,在選購進口產品時,要規避選取來源為禁止輸入國家的相關產品。
質量認證:合格的血清需要經過嚴格的多重質檢和驗證,確保不含有有害微生物,如細菌、真菌、支原體、病毒等。同時,血清也必須通過各種性能測試實驗。
批次穩定性:由于血清制品來源于天然活體,供體牛的生理狀況、健康狀況均不同,因此批間差異在所難免。但是,選擇批次差異小的血清可以保證血清質量,確保細胞培養效果,并減少由于批間差異帶來的使用前測試。
血清使用中的常見問題
血清中的沉淀是什么,是否會影響細胞生長?
血清中的沉淀通常包括膽固醇、蛋白沉淀、纖維蛋白和磷酸鈣等物質。這些沉淀物在血清中可能以不同的形態存在,如絮狀纖維蛋白或小黑點樣的磷酸鈣。多數研究和實驗經驗表明,血清中的沉淀物不會對細胞的正常生長產生顯著影響。
圖2 血清中的沉淀
如何進行血清的梯度替換
當細胞培養需要更換血清品牌時,需要考慮細胞的適應過程。不同品牌的血清所含成分有一定差異,血清更換會使細胞發生不適,從而出現細胞增殖緩慢或細胞狀態不佳等情況。血清梯度替換的一般流程為:先用20%新血清與80%原血清進行混合,培養傳代1-2次;之后用50%新血清與50%原血清混合培養傳代;再用80%新血清與20%原血清混合培養傳代;最后完全使用新血清培養傳代。
HyClone胎牛血清:細胞培養的
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